如何驗(yàn)證連蓋八連管與儀器的適配性?

以下是驗(yàn)證連蓋八連管(0.1ml/0.2ml)與PCR儀器適配性的標(biāo)準(zhǔn)化流程：

一、物理適配性檢測(cè)

尺寸匹配測(cè)試‌

將八連管插入儀器加熱模塊，觀察是否貼合無(wú)松動(dòng)

檢查管蓋閉合狀態(tài)是否影響儀器熱蓋壓合(尤其矮管設(shè)計(jì))

密封性驗(yàn)證‌

加入50μL染色水溶液，運(yùn)行空載PCR程序后檢查液體蒸發(fā)量(應(yīng)<5%)

熒光定量實(shí)驗(yàn)需額外測(cè)試管蓋透光性(平蓋光損失率需<1%)

二、熱力學(xué)性能測(cè)試

溫度均一性檢測(cè)‌

使用熱電偶測(cè)量各孔實(shí)際溫度，與設(shè)定值偏差應(yīng)≤0.3℃

推薦程序：95℃ 30秒→60℃ 30秒(循環(huán)5次)

升降溫速率驗(yàn)證‌

薄壁管(0.1ml)在ABI 7500上應(yīng)達(dá)到4℃/秒升溫速率

Roche 480需確認(rèn)管壁厚度≤0.2mm

三、功能實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

標(biāo)準(zhǔn)品擴(kuò)增測(cè)試‌

使用λDNA梯度稀釋樣本(10?-10?拷貝/μL)進(jìn)行qPCR，Ct值CV應(yīng)<2%

熒光兼容性測(cè)試‌

白色管需驗(yàn)證FAM/HEX通道信號(hào)強(qiáng)度提升≥15%(對(duì)比透明管)

透明管需檢測(cè)自發(fā)熒光背景值(OD450應(yīng)<0.05)

四、適配性記錄表

檢測(cè)項(xiàng)目 合格標(biāo)準(zhǔn) 備注

物理匹配度 無(wú)卡頓/漏液 需測(cè)試8連管整體插入

溫度均一性 孔間溫差≤0.5℃ 建議使用第三方校準(zhǔn)儀

擴(kuò)增效率 90-110% 使用標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證

(注：不同品牌儀器可能存在特異性要求，如Roche 480需專用矮管設(shè)計(jì))以上資料僅供參考，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師及供應(yīng)商。

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