國產(chǎn)本生96孔板接種細胞步驟
 

　　為了做實驗，細胞鋪勻是常見的一種。然而，有許多人不是很成功，分布也不均勻:要么中間密集，周圍稀疏，要么周圍密集，中間禿頂。以下是利用96孔板把細胞鋪勻，希望對大家有用!

　　本生96孔板方法/步驟

　　1、通常，在96孔板的每個孔中加入100微升細胞懸浮液。 從底部附近的井的左側(cè)添加細胞懸浮液。  加入一半平板后，混合細胞懸液，不要再加入，繼續(xù)加入剩余的一半平板。  添加完所有板后，蓋上板，用左手輕輕握住板的左側(cè)，用右手輕輕輕敲板的右邊緣，注意抓力(我通常輕敲三次)。 如果它太強或太多次，細胞就會被濃縮和堆積。  順時針旋轉(zhuǎn)盤子(逆時針效果不好)，依次敲擊剩余的三面，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱中。

　　對于6孔板、12孔板或24孔板，我在個孔中加入少量無血清培養(yǎng)基，搖動并滲透到整個孔的底部，然后用移液管槍將整個孔的底部吸到第二個孔中。用同樣的方法滲透到井底，同時模擬其它井，這樣整個井底都是濕的，細胞懸浮液將平放在整個井底。  加入細胞懸液時，可以避免中間加入更多細胞，中間加入更少細胞的現(xiàn)象，細胞分散更均勻。  注意，加入細胞懸液后，細胞懸液應(yīng)放在工作臺上靜置。這個方法有點慢，但是當(dāng)你熟練的時候它并不慢。也可以涂抹，但強度不如96孔板，效果不如96孔板，所以我放棄了滲透井底的方法。

　　2、加入細胞懸液后，抬起細胞培養(yǎng)板，從底部向上觀察光線，看細胞是否聚集。然后從底部敲擊以分散它。

　　3、如果實驗室有平板振蕩器，建議用這個儀器輕微振蕩。 效果好，即振幅小、頻率高。

　　4、細胞應(yīng)該盡可能分散，大多數(shù)細胞處于單一狀態(tài)。離心后，*懸浮!有轉(zhuǎn)移到六孔板上的，就是震動!搖晃時，不要讓細胞液轉(zhuǎn)向，否則細胞會全部被帶到中間而不均勻!

　　5、當(dāng)一瓶細胞裝滿后，進行正常處理。 將它均勻地吹進培養(yǎng)瓶中，然后鋪上6孔板，每孔2ml。 涂抹后，不用觀察直接用酒精棉擦拭，然后放入培養(yǎng)箱中。  稍微向左三圈，向右三圈，先三圈，然后三圈?；旧?，24小時后，每個孔中的細胞將非常均勻。

　　6、計算所有所需的液體和細胞數(shù)量，混合均勻，并將其添加到六孔板中。 六孔板呈水平8字形波動。 在顯微鏡下觀察。  如果不均勻，按照上述方法再次搖動。如果細胞沒有計數(shù)并直接種植，在種植六孔板的過程中隨時搖動混合瓶。 我通常順時針或逆時針轉(zhuǎn)動瓶子。

　　7、先上下移動，然后在水平板上左右移動，每個方向移動5-6次，但關(guān)鍵是搖動后直接放入培養(yǎng)箱，不要做太多的運動，如照鏡子，否則很容易在中間再次聚在一起。

　　本生96孔板  本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。